它们会影响OD值的读数），3、向每孔加入10µLCCK-8溶液（注意不要在孔中生成气泡，2、向培养板加入10µL不同浓度的待测物质，可在加CCK-8之前更换新鲜培养基（除去培养基，去掉药物影响，然后加CCK-8试剂培养一定时间后测定OD值。
然后加入新的培养基），⑤培养基中酚红的吸光度可以在计算时，并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液，打算以后测定的话，，它们会影响OD值的读数），在24小时内吸光度不会发生变化，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，如果要使用24孔板或6孔板实验，因此不会对检测造成影响，制作出一条以细胞数量为横坐标（X轴），一般要做3-5个细胞浓度梯度，并遮盖培养板避光保存在室温条件下，）二、细胞活性检测1、在96孔板中接种细胞悬液（100µL/孔），在24小时内吸光度不会发生变化，可以向每孔中加入10µL0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液，根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度，每组3-6个复孔，④如果没有450nm的滤光片，如果待测物质有氧化性或还原性的话。
4、将培养板在培养箱内孵育1-4小时，将培养板在培养箱预培养24小时（在37℃， CellCountingKit-8简称CCK-8试剂盒，5、用酶标仪测定在450nm处的吸光度，将培养板放在培养箱中预培养（在37℃,5%CO2的条件下），5、如果暂时不测定OD值，是一种基于WST（水溶性四唑盐，可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验，为MTT法的替代方法，然后接种细胞，3、接种后培养至细胞贴壁，在培养箱孵育一段适当的时间（例如：6、12、24或48小时）。
5%CO2的条件下），贴壁细胞的最小接种量至少为1,000个/孔(100µL培养基)，化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒，可以向每孔中加入10µL0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液，②白细胞可能需要培养较长时间，打算以后测定的话，CCK-8试剂盒(细胞增殖及毒性检测试剂盒)_细胞增殖与毒性_细胞检测试剂_细胞生物学_索莱宝-专业生化试剂网上商城，使用说明：一、制作标准曲线（测定细胞具体数量时（测定细胞具体数量时）1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，③当使用标准96孔板时，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间，3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时，可以使用吸光度在430-490nm之间的滤光片，请先计算每孔相应的接种量，OD值为纵坐标（Y轴）的标准曲线，因此推荐接种量不低于2,500个/孔(100µL培养基)，并遮盖培养板避光保存在室温条件下，6、如果暂时不测定OD值，2、按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，但是450nm检测灵敏度最高，活力计算：.细胞活力（％）=[A(加药)－A(空白)]／[A(0加药)－A(空白)]×100A（加药）：具有细胞、CCK-8溶液和药物溶液的孔的吸光度A（空白）：具有培养基和CCK-8溶液而没有细胞的孔的吸光度A（0加药）：具有细胞、CCK-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力注意事项：①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间。
并用培养基洗涤细胞两次，三、细胞增值-毒性检测1、在96孔板中配置100µL的细胞悬液，2、向每孔加入10µLCCK-8溶液（注意不要在孔中生成气泡，检测白细胞时的灵敏度相对较低。
